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微生物实验室日常工作规范!

放大字体  缩小字体 发布日期:2018-03-29  来源:食品实验室服务微信公众号  浏览次数:2588
核心提示:为了规范微生物的日常工作,达到日常工作实事求是、及时准确、优质服务、质量至上的目标,保证日常工作的顺利进行,做如下规定:
一、微生物检测意识


树立正确的无菌观念和检测人员的素质,是每一个微生物检测人员应具备的素质,好的修养素质和积极的工作态度是保证结果准确的基础,下面的规定规范都是为检测服务的,如果检测人员没有好的素质,这些规定都是虚设,摆设;希望下面的规范是每位检测人员想要做得,而不是强加在自己身上的紧箍咒。

 

①增强自己得生物安全意识,如何保护自己,如何保护样品,如何无菌操作,有责任心。

 

②实验原理,实验原理是实验的精髓,掌握它,就能够对整个实验更好的了解深入,学习研究。

 

③实验条件的把握,对实验的每个条件是否掌握清楚,实验的关键控制点是否清楚。

 

④实验结果的把握,一个实验结果的出现,首先应该自我分析,并且具备这种分析能力,对异常如何处理或是进一步验证。

 

⑤具备研究好学心态,检测工作是一个相对只是含量较高的职业,高科技飞速发展的今天,许多当时的先进技术不久就陈旧落后,检测工作也一样,优秀的化验员总是虚心好学,善于研究,总是处在科技的前沿。

 

⑥人员素质,积极向上,乐于助人,对工作负责,工作第一等,努力提高自己的工作质量。

 

 

二、微生物检测


1.实验前的准备

1.1无菌间

无菌间是微生物实验的重要环节,关系到实验结果的准确性,无菌间的使用规范要严格要求,保证实验环境影响因素降到最低。

 

使用要求:

1、无菌间在使用前,必须先进行清理、臭氧杀菌时间50min或紫外灯杀菌30min。

 

2、检测使用的器皿、样品等物品的进出,通过缓冲窗进行传递,使用完毕后紫外灯杀菌30min,开传递窗时禁止两边同时打开。

 

3、检测人员进入缓冲间后,先更换拖鞋、佩带无菌帽和一次性口罩,更换衣服,并将其摆放整齐,方可进入无菌间。

 

4、进入无菌室过程中,依次打开和关闭各缓冲间的门,以避免空气流通带入外界的杂菌。

 

5、无菌操作前必须使用75%酒精对手部进行消毒,接种有害菌种时必须戴手套。

 

6、进行接种所用的吸管,平皿及培养基等必须经严格消毒灭菌,打开包装未使用完的器皿,不能放置后再使用,金属用具应高压灭菌或用95%酒精点燃烧灼后使用,剪刀、镊子至少每周进行一次高压灭菌。

 

7、从包装中取出吸管时,吸管尖部不能触及外露部位,使用吸管接种于试管或平皿时,吸管尖不得触及试管或平皿边。

 

8、接种样品、转种细菌必须在酒精灯前操作,接种细菌或样品时,吸管从包装中取出后及打开试管塞都要通过火焰消毒。

 

9、接种环或针在接种细菌前应经火焰烧灼全部金属丝,必要时还要烧到环和针与杆的连接处,接种结核菌和烈性菌的接种环应在沸水中煮沸5min,再经火焰烧灼。

 

10、吸管吸取菌液或样品时,应用相应的橡皮头吸取,不得直接用口吸。

 

11、检验结束后,所有带菌的培养基、试剂、稀释液和器皿必须尽快清理出无菌间灭菌洗刷。

 

12、检验结束后,人员离开无菌间前,须将无菌间的卫生彻底清理、并用紫外灯进行杀菌。

 

13、无菌间所用工器具(剪刀、镊子、胶头、涂抹棒、托盘盒等)使用完毕后,摆放整齐。

 

14、灭菌后的无菌间悬挂“已灭菌”标识,正在使用的无菌间要悬挂“使用中”标识。防止检测人员在未经过灭菌的无菌间中进行微生物检测。

 

其它注意事项:

1.  禁止在无菌间内打手机,由于业务需要可在缓冲间内打手机。

 

2.  实验过程中穿着整齐,不要出现露头发、鼻孔等现象,禁止在无菌间打闹、喧哗。

 

3.  实验过程中,物品要摆放整齐,实验产生的垃圾要单独存放不要乱放,防止污染实验样品。

 

4.  紫外灯每周五打扫卫生时要用酒精棉球擦拭,防止灰尘阻挡影响杀菌效果。

 

1.2实验器具

实验器具是微生物实验的一个关键控制点,实验器具的无菌是保证实验结果准确的重要因素。

 

①培养皿,首先应确认是否经过消毒,确认后进行外观检查,观察是否有破损,有破损处废弃。灭过菌的平皿最多保存一周时间。打开的平皿整齐的摆放到实验台上备用,发现有破裂的平皿应废弃;使用时看是否有平皿内部存有杂质、培养基等异物也应立即废弃。


玻璃器皿,新购置玻璃器具因含有游离碱,应在清洁液或2%盐酸内浸泡24小时,再用蒸馏水清洗。检验沾染的油迹、污浊物等器具可用10%NaOH浸泡1小时后,用清水冲洗干净。每周洗刷盛生理盐水的三角瓶子,防止水垢太厚影响灭菌和微生物生长。


实验完毕后,使用的实验器具应立即清洗消毒,防止微生物增长污染或者伤害到人员。所有卫生用具如拖把、扫帚、抹布、垃圾桶等都要根据污染区、清洁区、无菌区要求严格区分开、并专用,不得相互混淆,卫生用具每周定量用1:20次氯酸钠液消毒浸泡、清洗、凉干,以免污染。

 

在进行各种检验时,应避免污染;遇有场地、工作服等污染时,应立即处理,防止细菌扩散以免造成污染。凡吸过菌液的吸管或滴管或染菌的培养皿,应立即放入盛有消毒液的容器内或高压灭菌处理。工作人员必须每天坚持做好环境卫生工作,防止灰尘飞扬,定期对整个操作环境进行消毒。

 

1.3药品的使用

微生物药品是微生物实验的一个关键控制点,培养基质量的关系到检测结果准确的重要因素。

 

①药品的采购,实验药品缺少时,由药品管理员上计划。微生物药品常规药品按“箱”进行计算,不常用药品按“瓶”进行计算,生化鉴定管按“支”进行计算,每种保留至少1个单位库存量。

 

②药品取用,药品取用时到药品管理员取钥匙,取用后将药品柜锁死,并将钥匙归还给药品管理员。取用人员发现药品低于1个单位库量时,及时通知药品管理员。

 

③将近过期药品(2个月),生化鉴定管可以退货,其他药品抓紧时间使用,过期药品废除。

 

④新药品使用时,应注意检查包装是否有破损?粉末状药品是否有结块?有无杂质?有无变色等异常。

 

⑤药品称量按照使用要求配制,并填写药品配制记录。

 

⑥配制好的药品按照灭菌要求进行,含糖的培养基灭菌总时间不超过45min,灭菌后观察培养基的颜色、容量等,并摇匀培养基,放置琼脂沉淀到底部。

 

培养基使用前,按要求进行溶解,在溶解过程中要防止二次污染和溶解不充分;溶解后放到45~50度,放置备用时间不超过4h。


使用时,进行冷却温度控制到45度左右,过高容易杀死微生物,过低培养基凝固。

 

倾倒培养基时应注意无菌操作,并摇匀培养基。倾倒过多,培养基过厚需氧环境不好,过薄培养基容易干裂影响检测结果,配制培养基尽可能按照样品量进行配制,使用后的培养基根据情况废弃或保存。

 

1.4灭菌锅的使用

灭菌锅属于高压灭菌容器,安全性和灭菌效果是控制的重点,使用规范如下:

安全事项:由于灭菌锅属高压容器,压力表要及时计量,操作过程中人员不得离开现场,如有异常问题及时通知相关人员,机修,管道。

 

①检查高压灭菌锅的外观是否正常,压力表、温度计是否归零,各管路阀门是否为关闭状态。

 

②排放物品,注意不要过满;关锅并将标示牌转到已灭菌,调节阀打到排气状态。

 

③打开总阀门,打开排水法,进行管道排水,约1-2min当听到无水声时,关闭排水法。

 

④打开进气阀和出气阀,进行排气,此过程是对锅内空气进行排气,防止空气存在影响灭菌效果。

 

⑤排气等夹层压力达到0.5Mpa,将调节阀调到灭菌状态进行灭菌,培养基121℃15min;其他特殊培养基安灭菌要求进行灭菌。注意事项由于温度为手控,所以灭菌过程中要注意温度的变化。

 

⑥灭菌完毕后,填写灭菌记录,并关闭进气阀,排气阀不用关闭,并等温度降低60度左右,压力降到0;如果压力过大时开锅有可能打不开,另一个容易造成液体倒吸使瓶塞蹦出。

 

⑦开锅后,及时将培养基取出摇匀后冷却,物品取出后负责人要及时清锅,防止其他物品污染灭菌物品。

 

⑧灭菌结束后,将排水阀打开,防止管道积水。

 

其他注意事项:

①温度计无变化:1.温度计损坏,2.电源未打开,3.探针堵塞,4.调节阀损坏不进气。

 

②锅门打不开:1.压力过大,2.调节阀损坏,内部负压。

 

③管道漏气:找管道维修。

 

④灭菌锅的每周清洁污物及凝结水同时清洗;灭菌锅要保持干净并无残留物(尤其滤器)以防止生锈保证最大热传递和橡胶用具以蒸沸15min灭菌为宜,高温高压处理易失去弹性。

 

⑤容积控制:采取称中法测定蒸发量,体积100vml稀释起重量为101vg,高压够体积偏差不超过1%。

 

1.5培养箱的使用

培养箱的温度、湿度控制是微生物控制的关键点。使用规范如下:

①外观检查,有无噪音,是否放平稳,有无故障。

 

②检查温度设置是否为检测要求温度?显示温度与设定温度是否在允许波动范围内。

 

③为了保持培养箱内部湿度,可在培养箱内放一个盛水的小烧杯,防止培养基干燥。

 

④培养箱内物品摆放整齐,但不要过紧密,防止温度,空气等环境之间的差异对检测结果的影响,并关好箱门(轻开轻关)。

 

⑤每天对培养箱内温度计和显示温度进行比较,填写仪器设备使用记录,对较大差异的查找原因进行处理。

 

⑥保持好培养箱内卫生,对有异味的培养箱进行通气,并每周对培养箱进行消毒杀菌,培养后的平皿及时清理,防止霉菌或其他微生物累积。

 

⑦冰箱每周进行除霜清理,存放的物品做好记录,对不用的物品及时清理。

 

 

三、样品接收

2.1送检样品的处理

微生物接受样品,就是检验工作开始之时,样品接收、交接环节是检验工作的第一环节,关系到检验工作质量和效率。

为了真实的反应车间加工产品的质量情况,正确的指导车间生产。具体措施如下:

化验员到车间自取样品,保证每个车间每周1个样品,并在化验结果后备注“自取”。另外有特殊情况可增加取样量,微生物考核时按正常样品计算,在自取样品栏里填写。

 

2.2样品运输

个人车间样品由自己取,便于与车间交流沟通,掌握产品信息和工艺,对微生物检测判断有帮助。微生物样品运输过程中必须采用保温袋,防止温度变化;另外运输过程中样品不要落地,防止袋子破损污染样品。

 

2.3样品保存

冷冻品按要求进行解冻,干燥食品可放在常温冷暗处,易腐和冷却样品应放入10℃环境。冷冻样品来不及检验应放入-15℃以下冰箱内。

原则上冷冻样品取出后,按包装原样在室温下自然解冻;也可在0-4℃环境解冻,时间不超过18小时;也可在温度不超过45℃环境中解冻,时间不超过15min。

 

2.4样品制备

根据样品不同性状、类型的食品,进行适当处理,尽可能的保证均匀取样。或按照检测方法进行样品处理。

 

 

四、日常工作

4.1文件资料及物品的规定

为了规范微生物资料管理,起到工作有秩序的目的,防止重要资料丢失。特对资料整理规定如下,希望大家严格执行,为我们创造一个良好的工作环境。

4.1.1个人桌面

1.原始记录夹子要有对应车间的标签,没有的可向组长索要打印一张,不要出现标签与内容不符的现象。

2.个人资料必须放到夹子里面,不要在桌面出现装订纸张。

3.原始记录、抽取单不要随意乱放,防止客户参观时随意翻看,泄漏客户机密,记录完毕后,要整齐放到办公室夹子座里面。

4. 其它资料包括书籍等要放到小柜里,借阅、归还时要到资料管理员签字,借阅的书籍也不要乱放,看完后要整齐放在办公室桌子,禁止放到实验区(可在实验区阅读)。

5. 有单页报告单或者其他资料时,可放到插页夹子里,每组一个,桌面不要出现单页纸。

 

4.2电子文档

1.电脑不允许下载歌曲游戏等。

2. 建立的新表格无用处时立即删除。

3.提供客户报表要存到相应的文件夹,防止文件丢失,并对提供文件标黄底

4. 不可随意改动报表,尤其是汇总结果时禁止在车间报表上直接改动。

5.  每月结束后,设备管理员负责进行数据拷贝留存。

编辑:songjiajie2010

 
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